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發(fā)布日期:3/12/2025 9:22:00 AM

生物染色劑的應(yīng)用范圍涵蓋細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)、微生物學(xué)等領(lǐng)域,以下是幾種實(shí)驗(yàn)室常用生物染色劑的典型應(yīng)用:

     一、細(xì)胞核染色劑  

     1.   蘇木素(Hematoxylin)    

    用途:核染色(結(jié)合伊紅用于H&E染色)。  

    原理:與DNA結(jié)合,形成藍(lán)紫色復(fù)合物。  

    應(yīng)用:組織切片中細(xì)胞核顯色(需媒染劑如明礬)。  

 

     2.   吉姆薩染液(Giemsa Stain)    

    用途:血涂片、瘧原蟲(chóng)、染色體顯帶。  

    原理:天青 伊紅復(fù)合物結(jié)合核酸,區(qū)分核與胞質(zhì)。  

    特點(diǎn):顯示細(xì)胞核(紫色)、胞質(zhì)(藍(lán)色)及病原體。  

 

     3.   結(jié)晶紫(Crystal Violet)    

    用途:革蘭氏染色(初染)、染色體壓片。  

    原理:穿透細(xì)胞壁與核酸結(jié)合,革蘭陽(yáng)性菌保留紫色。  

 

      二、細(xì)胞質(zhì)染色劑  

     1.   伊紅(Eosin)    

    用途:胞質(zhì)及膠原纖維染色(H&E中的“E”)。  

    原理:酸性染料結(jié)合堿性蛋白,呈粉紅色。  

    應(yīng)用:區(qū)分細(xì)胞質(zhì)與核。  

 

     2.   亮綠(Light Green)    

    用途:植物細(xì)胞質(zhì)染色(如與番紅聯(lián)用)。  

    特點(diǎn):短暫染色后易褪色,需控制時(shí)間。  

 

      三、特殊結(jié)構(gòu)染色劑  

     1.   碘液(Lugol's Iodine)    

    用途:淀粉檢測(cè)(藍(lán)黑色)、革蘭氏染色媒染劑。  

    應(yīng)用:植物細(xì)胞淀粉粒顯色,細(xì)菌革蘭染色輔助。  

 

     2.   番紅O(Safranin O)    

    用途:革蘭氏染色(復(fù)染)、植物木質(zhì)化細(xì)胞壁。  

    特點(diǎn):革蘭陰性菌呈紅色,與結(jié)晶紫對(duì)比鮮明。  

 

     3.   蘇丹III/IV(Sudan III/IV)    

    用途:脂類染色(橙紅色)。  

    原理:脂溶性染料溶于脂肪顆粒。  

    應(yīng)用:脂肪細(xì)胞、細(xì)胞膜脂滴觀察。  

 

     4.   剛果紅(Congo Red)    

    用途:纖維素染色(藍(lán)紅色)、淀粉樣蛋白檢測(cè)。  

    特點(diǎn):遇酸變藍(lán),用于植物細(xì)胞壁區(qū)分。  

 

      四、微生物專用染色劑  

     1.   抗酸染色劑(Ziehl Neelsen Stain)    

    成分:石碳酸品紅(堿性品紅+酚)。  

    用途:結(jié)核桿菌、麻風(fēng)桿菌(抗酸菌呈紅色)。  

 

     2.   墨汁負(fù)染(India Ink)    

    用途:隱球菌莢膜觀察(背景黑色,莢膜透明)。  

    原理:染料不穿透細(xì)胞,凸顯透明結(jié)構(gòu)。  

 

     3.   乳酸酚棉藍(lán)(Lactophenol Cotton Blue)    

    用途:真菌菌絲、孢子染色(藍(lán)色)。  

    特點(diǎn):兼具固定與染色功能。  

 

      五、熒光染色劑  

     1.   DAPI(4',6 Diamidino 2 Phenylindole)    

    用途:DNA特異性熒光標(biāo)記(藍(lán)色熒光)。  

    應(yīng)用:活細(xì)胞或固定細(xì)胞核定位。  

 

     2.   碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)    

    用途:死細(xì)胞核染色(紅色熒光)。  

    原理:不能穿透完整細(xì)胞膜,標(biāo)記壞死細(xì)胞。  

 

      六、對(duì)比表格  

染色劑

主要目標(biāo)

顏色

典型應(yīng)用場(chǎng)景

蘇木素

細(xì)胞核

藍(lán)紫色

組織切片H&E染色

伊紅

細(xì)胞質(zhì)

粉紅色

與蘇木素聯(lián)用(H&E)

吉姆薩

血細(xì)胞、病原體

/藍(lán)色

瘧原蟲(chóng)、染色體分析

結(jié)晶紫

革蘭陽(yáng)性菌

紫色

革蘭氏染色初染步驟

蘇丹III

脂類

橙紅色

脂肪細(xì)胞染色

DAPI

DNA

藍(lán)色熒光

熒光顯微鏡核定位

 

      注意事項(xiàng)    

1.   毒性:部分染色劑有致癌風(fēng)險(xiǎn),需戴手套操作。  

2.   固定步驟:組織染色前需固定(如甲醛)防止結(jié)構(gòu)破壞。  

3.   脫色控制:革蘭染色中乙醇脫色時(shí)間影響結(jié)果準(zhǔn)確性。  

 

 

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